非洲猪瘟病毒E199L-CP204L-E183L串联序列在杆状病毒表达系统中的表达及免疫效果评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张寅寅

作者： 张寅寅;李智晟;王晨晓;倪洁;刘静宜;陈鸿军;孙耀贵

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;E199L;CP204L;E183L;杆状病毒;免疫评价

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 54 卷 011 期

页码： 1458-1464

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究将非洲猪瘟病毒E199L-CP204L-E183L串联序列，克隆到pFastBac1中，获得重组质粒pFastBac-CMV-EGFP-P2A-E199L-CP204L-E183L-HA，将其转化至DH10Bac感受态细胞中，经抗性、蓝白斑筛选及PCR鉴定，获得重组杆粒。将重组杆粒转染sf9细胞，细胞出现明显病变后进行传代，获得重组杆状病毒rBac-E199L-CP204L-E183L。利用蛋白质免疫印迹（Western-blot）及间接免疫荧光法（IFA）对重组杆状病毒的蛋白表达情况进行检测。结果显示，IFA检测到明显荧光，Western-blot检测到大小符合目的蛋白的条带，表明重组杆状病毒表达成功。将构建的重组杆状病毒免疫BALB/c小鼠，通过检测血清特异性抗体和T淋巴细胞增殖水平验证重组杆状病毒的免疫效果。结果表明，二免后第14天，在免疫小鼠中检测到抗pE199L、p30、p54蛋白的特异性抗体，免疫组小鼠的淋巴细胞增殖水平均显著高于对照组小鼠。以上结果表明，本研究成功构建了能够表达串联抗原的重组杆状病毒，免疫小鼠后能够诱导小鼠产生体液免疫反应及刺激淋巴细胞增殖。

分类号： S852.65

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