牛冠状病毒家兔源多克隆抗体的制备与应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘筱筱
作者: 刘筱筱;余秋蓉;李霞;毛立;许信刚;李彬
作者机构:
关键词: 牛冠状病毒;多克隆抗体;双抗体夹心ELISA;鉴定
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年 55 卷 010 期
页码: 1334-1340
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 不断发现的新型冠状病毒对人类的危害极其严重,牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)具有致人畜共患病的潜力,而BCoV分离鉴定及病原检测均缺乏有效的方法.本研究制备与BCoV发生特异性反应的家兔多克隆抗体,为BCoV的检测和鉴定奠定技术基础.本研究将BCoV灭活后免疫家兔制备针对病毒的多克隆抗体.经3次免疫后检测血清中和效价,将纯化后的多克隆抗体用于间接免疫荧光(IFA)、免疫印迹(Western-blot)和夹心ELISA试验.结果显示,制备的家兔多克隆抗体与BCoV反应,血清中和效价可达到1∶28,与羊冠状病毒(cpCoV)反应,可达1∶29.经IFA鉴定,该多克隆抗体能够与不同毒株的BCoV和cpCoV发生特异性反应;Western-blot分析发现在约50kDa处出现特异性条带;将家兔多克隆抗体作为夹心ELISA的包被抗体,只与BCoV和cpCoV发生特异性反应,而不与其他病毒发生交叉反应.该多克隆抗体与不同毒株的BCoV和cpCoV特异性结合,可用于分离鉴定BCoV和cpCoV的IFA和Western-blot分析,制备的多克隆抗体还可作为包被抗体用于检测BCoV与cpCoV的双抗夹心ELISA.本研究为BCoV与cpCoV的病原检测与流行病学调查奠定了基础.
分类号: S852.659.6
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