水貂阿留申病病毒VP2蛋白基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王振军

作者： 王振军;吴威;闫喜军;呼延良浩;朱春生

作者机构：

关键词： 水貂;阿留申病病毒;VP2基因;结构蛋白;昆虫杆状病毒表达系统

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 12 期

页码： 1246-1251

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了得到结构和功能近似于天然的水貂阿留申病病毒G株(ADV-G)的衣壳蛋白VP2,将ADVG的VP2基因5′端添加His标签后克隆到杆状病毒转移载体(pFastBac1)后转化入大肠杆菌DH10Bac中重组,筛选重组成功的克隆进行菌液扩增,获得重组的杆粒(Bacmid),然后用重组杆粒转染昆虫细胞(sf9),获得重组的杆状病毒。用P3代病毒感染sf9细胞,接毒后第48小时进行免疫荧光试验,结果,检测到特异的绿色荧光,证实目的蛋白得到成功表达。Western-blot分析结果显示,表达的VP2蛋白能够与His标签单抗和ADV阳性血清产生特异性免疫印迹反应。经过对流免疫电泳(CIEP)验证,在敏感性、特异性、重复性、稳定性方面,表达的VP2蛋白与商业抗原有一致的表现。采用超速离心法对病毒液进行浓缩后,在电子显微镜下可见约为20nm的病毒样颗粒(VLPs)。以上试验结果表明,ADV VP2蛋白在昆虫杆状病毒中得到有效表达,并具有良好的反应原性。

分类号： S852.659.2

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