非洲猪瘟病毒p54蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 敖清莹

作者： 敖清莹;钟秋萍;史馨瑾;魏常青;刘英楠;廖欣欣;谢振华;钱莺娟;郑龙三;陈鸿军

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p54蛋白;昆虫细胞表达系统;免疫原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 004 期

页码： 164-169

摘要： 非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白由晚期基因E183L编码,是主要的结构蛋白之一.为了获得免疫原性强的p54蛋白,本研究将E183L基因克隆至pFastBac1载体中,取1 μg重组质粒转座DH10Bac感受态细菌,经三轮蓝白斑筛选后,获得重组Bacmid-p54.将提取的Bacmid-p54质粒DNA转染Sf9细胞,出现明显病变后,收获细胞培养上清,在正常Sf9细胞中传三代,获得的杆状病毒命名为rBac-P54.利用SDS-PAGE检测rBac-P54感染后昆虫细胞的蛋白表达情况,并通过间接免疫荧光(IFA)和Western-blot鉴定p54蛋白的免疫原性.结果显示,在感染的Sf9细胞中,p54蛋白能获得高效表达,并可被ASFV阳性血清特异性识别.这表明杆状病毒系统表达的p54蛋白具有良好的免疫原性,为后续开展非洲猪瘟血清学诊断和p54功能研究奠定基础.

分类号： S852.651

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