基于GNS蛋白的牛流行热病毒感染与免疫鉴别诊断ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何辰香

作者： 何辰香;高闪电;田占成;独军政;王锦明;关贵全;殷宏

作者机构：

关键词： 牛流行热;牛流行热病毒;牛流行热灭活疫苗;GNS蛋白;鉴别诊断ELISA

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 4320-4326

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在建立牛流行热病毒（BEFV）感染与疫苗免疫的抗体ELISA诊断方法。在证实BEFV GNS截短体与BEFV感染血清特异性反应的基础上，利用原核表达系统表达纯化GNS全长蛋白并以其作为包被抗原，优化反应条件，建立基于BEFV GNS的鉴别病毒感染与疫苗免疫的BEFV间接ELISA方法。结果显示：在大肠杆菌中成功表达GNS蛋白，主要以包涵体的形式存在，纯化获得73 ku的重组蛋白。Western blot结果显示，纯化后的重组蛋白与BEFV感染牛血清反应原性良好，且与BEF疫苗免疫牛血清未见反应。GNS抗原最佳包被浓度为0.50μg·mL-1,血清最佳稀释度为1∶20,酶标二抗最佳稀释度为1∶4 000,阴阳性临界值为S/P值0.206 9。该方法与BVDV、FMDV以及IBRV阳性血清无交叉反应，特异性良好；批内和批间变异系数均小于10%,重复性良好，可用于BEFV感染与疫苗免疫牛的鉴别诊断。

分类号： S858.23

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