文献类型： 中文期刊
第一作者： 吕雪莲
作者： 吕雪莲;于申业;倪宏波;衣菲;田秋丰;刘思国
作者机构：
关键词： 毒力岛SPI-1;Red同源重组;缺失株
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2014 年 36 卷 11 期
页码： 852-855
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 沙门菌依赖毒力岛SPI-1编码的Ⅲ型分泌系统在侵染宿主肠道上皮细胞中起重要作用。为制备沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,本研究利用PCR扩增毒力岛SPI-1上下游同源臂和含有氯霉素抗性基因片段,连接p ET-28a构建打靶质粒,采用电击法将其转入含有p KD46a质粒的肠炎沙门菌中。经L-阿拉伯糖诱导同源重组后,鉴定阳性重组子,转化诱导产生重组酶FLp的p CP20质粒,从而删除氯霉素抗性基因,通过PCR方法鉴定缺失株,命名为SM6ΔSPI-1。连续培养鉴定表明缺失株具有良好的遗传稳定性。生长特性研究显示缺失株生长速率高于野生菌株。本研究利用改进的Red重组系统通过一步法构建了肠炎沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,为沙门菌毒力岛的功能研究与基因工程减毒疫苗研制奠定了基础。
分类号： S852.61
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