文献类型： 中文期刊
第一作者： 冯万有
作者： 冯万有;杨燕燕;蒙丽娜;陈春;何立珍;邓凯;杨小芬;覃广胜;石德顺
作者机构：
关键词： 基因编辑;靶向敲除;非编码基因
期刊名称： 畜牧兽医杂志
ISSN： 1004-6704
年卷期： 2022 年 41 卷 002 期
页码： 15-21
摘要： CRISPR/cas9基因编辑系统可高效的实现目标基因靶向敲除,是当前基因功能研究的强有力工具.然而目前该系统主要针对编码蛋白质基因的靶向编辑,靶向非编码基因,尤其是miR-NAs的基因少有报道.由于miRNA序列的简短性和多样性,从基因功能缺失的水平上研究其功能、成熟过程等还有一定的困难.我们基于CRISPR/cas9基因编辑系统,特异有效的敲除了HEK293T细胞中的miRNA-155和miRNA-182的种子区或发夹序列区,同时发现cas9与gRNA不同配比的转染剂量显著影响目标miRNA的敲除效率,其中cas9∶gRNA的转染剂量在1∶4时敲除效率最高.我们的研究阐明了 CIRSPR/cas9系统在靶向敲除miRNAs基因的可行性,为研究miRNA在特定细胞中的生理学功能提供技术基础.
分类号： S852.65+1
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