广西黄牛FGF2基因克隆、生物信息学分析及其在卵泡中的表达研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王云

作者： 王云;郑彦梓;唐振华;王燕新;贾茹茹;韦春烨;周东平;卢瑛;黄荣春;石德顺;陆凤花

作者机构：

关键词： 广西黄牛;FGF2基因;克隆;生物信息学;表达模式;卵泡发育

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2025 年 52 卷 011 期

页码： 5276-5286

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]克隆广西黄牛成纤维生长因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)基因CDS区序列并进行生物信息学分析,探究FGF2基因在广西黄牛不同组织及卵泡中的表达规律,为进一步探讨FGF2基因在卵泡发育过程中的功能奠定基础.[方法]以广西黄牛卵巢组织cDNA为模板,克隆FGF2基因片段,与其他物种进行相似性比对及系统进化树构建,并通过在线软件对FGF2蛋白进行生物信息学分析.利用实时荧光定量PCR检测FGF2基因在广西黄牛不同组织中的表达水平,采用ELISA方法检测小(卵泡直径3~4 mm)、中(5~8 mm)、大(>8 mm)卵泡卵泡液中的FGF2浓度,并结合免疫荧光技术及实时荧光定量PCR探究FGF2基因在广西黄牛卵泡中的定位及表达规律.[结果]广西黄牛FGF2基因CDS区全长468 bp,共编码155个氨基酸.广西黄牛FGF2蛋白氨基酸序列与猪、山羊、绵羊、兔的相似性超过98%,在哺乳动物中表现出高度保守性.生物信息学分析发现,广西黄牛FGF2蛋白为含14个磷酸化位点的碱性亲水蛋白,二级结构以无规则卷曲(61.94%)和延伸链(29.03%)为主,主要互作蛋白包括FGFR、PDGFRA、GPC1、EGFR等.组织表达分析发现,FGF2基因在广西黄牛各组织中均有表达,其中在卵巢和肺脏组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05).检测不同直径卵泡卵泡液中的FGF2浓度发现,直径>8 mm卵泡卵泡液中的FGF2浓度显著高于3~4 mm卵泡(P<0.05).FGF2基因在卵母细胞中表达量显著高于颗粒细胞和卵泡膜细胞(P<0.05),其受体FGFR1基因在卵母细胞中表达量显著低于颗粒细胞和卵泡膜细胞(P<0.05).[结论]广西黄牛FGF2基因CDS区序列长468 bp,编码155个氨基酸,为稳定的碱性亲水蛋白,二级结构以无规则卷曲为主.FGF2基因在卵巢和肺脏组织中的表达量较高,在卵泡中主要来自卵母细胞,通过卵泡直径依赖性浓度变化调控卵泡发育.以上结果可为阐明FGF2基因在广西黄牛卵巢中的功能网络提供理论依据.

分类号： S823.8+1%Q78

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