大麦黄矮病毒单双价外壳蛋白基因植物表达载体构建及小麦遗传转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贾力

作者： 吴茂森;张文蔚;肖红;成卓敏

作者机构：

关键词： 大麦黄矮病毒;PAV中国分离物;外壳蛋白基因;花粉管通道法;转基因小麦

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2001 年 9 卷 01 期

页码： 23-27

收录情况： CSCD

摘要： 从我国小麦上分离纯化的大麦黄矮病毒ＰＡＶ分离物，通过ＲＴ－ＰＣＲ、克隆和序列测定后，确认该分离物的外壳蛋白基因由６００个核苷酸组成，编码１９９个氨基酸。该片段克隆到表达质粒ｐＥｍｕ－ｍｃｓ－Ｎ上，构建了植物表达载体ｐＰＰＩ１０，同时，在克隆了 ＰＡＶ和 ＧＰＶ外壳蛋白的基础上，构建了编码 ＧＰＶ＋ＰＡＶ双价 ＣＰ基因的植物表达载体ｐＰＰＩ１４。用花粉管通道法分别将这两种质粒导入小麦品种北京８３７。经ＫａｎＲ筛选、点杂交、ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等一系列分析鉴定，转化率分别为２．５％和０．３６％。温室和田间抗病毒接种，部分转基因植株对病毒的侵染表现出发病症状较轻，与未转化对照株相比，其发病时间明显延迟。由此推测，转基因植株获得了一定的抗性。

分类号： S432

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