猪伪狂犬病毒gD蛋白抗原表位的克隆及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘芳

作者： 刘芳;张冲;王寅彪;赵朴;邓瑞广;李学伍

作者机构：

关键词： 猪伪狂犬病病毒;gD基因;抗原表位;蛋白质表达

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2016 年 45 卷 04 期

页码： 122-125

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 依据Gen Bank中猪伪狂犬病毒(PRV)BJ/YT株gD基因设计引物,扩增gD蛋白抗原表位,其设计扩增长度为702 bp,将扩增片段克隆到p MD19-T载体获得p MD19-T-gD。利用Bam HⅠ和HindⅢ限制性内切酶双酶切p MD19-T-gD质粒,进行琼脂糖凝胶电泳并回收酶切片段,将回收片段与原核表达载体p ET-28a连接,成功构建了p ET-28a-gD表达载体。将表达载体转化感受态细胞Rosetta,IPTG诱导表达后,进行SDS–PAGE电泳,结果显示,在25 ku处出现特异性蛋白质条带。Western blot分析结果表明,表达产物能够被PRV的阳性血清识别。综上,成功克隆并表达了gD蛋白抗原表位,且其表达产物具有较好的生物学活性。

分类号： S852.65

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