猪囊尾蚴磷蛋白在毕赤酵母中的表达及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 苏彩霞

作者： 苏彩霞;才学鹏;韩雪清;骆学农;郑亚东;窦永喜

作者机构：

关键词： 猪囊尾蚴;磷蛋白基因;毕赤酵母;分泌型表达;诊断抗原

期刊名称： 生物工程学报

ISSN： 1000-3061

年卷期： 2003 年 19 卷 04 期

页码： 424-427

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将猪囊虫磷蛋白P2基因克隆到毕赤酵母表达系统分泌性表达载体pPIC9K中 ,构建了重组表达载体pPIC9K P2。经测序证明基因序列完全正确 ,从而大量制备重组质粒pPIC9K P2 ,并用SalⅠ、BglⅡ两种内切酶分别线性化 ,然后分别电转化毕赤酵母菌种GS115 ,采用G418抗性梯度筛选得到高拷贝重组菌株 ,利用MM和MD培养基鉴定重组菌株Mut表型 ,然后用甲醇进行诱导表达 ;并对表达产物通过SDS PAGE、Western blot和ELISA分析 ,结果表明 ,重组菌株成功地分泌表达了分子量大小为 12 6kD ,表达量占分泌总蛋白的 3 3 % ,且具有免疫反应活性的重组磷蛋白 ,从而解决了囊虫病诊断抗原来源问题并为研制新型猪囊虫疫苗奠定了基础

分类号： S852.7

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