马抗中东呼吸综合征冠状病毒特异性F(ab’)_2的制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邱泊宁

作者： 邱泊宁;胡星星;闫飞虎;王翀;崔健男;盖微微;曹增国;王化磊;赵永坤;杨松涛;夏咸柱

作者机构：

关键词： 中东呼吸综合征;冠状病毒;病毒样颗粒;免疫亲和层析;免疫球蛋白;F(ab’)_2

期刊名称： 中国生物制品学杂志

ISSN： 1004-5503

年卷期： 2019 年 02 期

页码： 173-180

收录情况： CSCD

摘要： 目的采用免疫亲和层析技术纯化制备马抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)特异性IgG与F(ab’)_2。方法以经MERS-Co V病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)对马匹进行多次免疫所制备的高免血清为原料,原核表达的MERS-CoV刺突蛋白S受体结合域(S-receptor binding domain,S-RBD)为抗原蛋白制备免疫亲和柱,提取制备抗原特异性IgG或F(ab’)_2。间接ELISA法检测各样品的活性,MERS假病毒中和试验检测样品的中和活性,BCA法测定样品的浓度,并计算收率。结果所制备的特异性IgG与特异性F(ab’)2的纯度分别为90. 1%和92. 8%,收率分别为8. 7%和3. 07%;在相同的浓度下,所制备的特异性IgG或F(ab’)_2的活性和中和活性均高于对照组中的血清总Ig G或总F(ab’)_2。结论成功制备了马抗MERS-CoV特异性IgG或F(ab’)_2,为建立更加安全与高效的抗MERS-CoV免疫球蛋白F(ab’)_2制备工艺奠定了基础。

分类号： R392-33

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