小麦蛋白激酶TaNPK启动子的克隆及活性分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 翟朝增

作者: 翟朝增;徐兆师;陈耀锋;刘沛;李连城;陈明;马有志

作者机构:

关键词: 小麦;启动子;染色体步移;原生质体;瞬时表达

期刊名称: 中国农业科学

ISSN: 0578-1752

年卷期: 2011 年 44 卷 19 期

页码: 3930-3936

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】克隆小麦蛋白激酶基因TaNPK启动子,并分析5′非编码区对盐胁迫的响应,探索TaNPK的调控机制,为解析小麦抗盐机制提供理论依据。【方法】利用染色体步移技术从小麦中分离TaNPK读码框上游序列,构建启动子缺失突变体,在PEG4 000介导下将重组质粒转入拟南芥叶片原生质体进行瞬时表达分析,以gus为报告基因研究不同调控序列的活性及盐诱导性分析。【结果】获得了TaNPK读码框上游2 004 bp的启动子序列,PEG介导的拟南芥原生质体瞬时表达分析表明,5′端缺失片段都在不同程度上驱动了GUS的表达;经过NaCl处理后的原生质体,GUS的表达量比不经处理的对照组明显提高,这与NaCl处理下TaNPK的实时荧光定量分析结果一致。【结论】经克隆获得了受盐胁迫诱导的小麦TaNPK启动子,启动子缺失区段在不同程度上驱动了gus的表达,-1 083—-1 296 bp区段可能含有响应盐胁迫的负调控元件。

分类号: S512.1

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