内蒙古绒山羊Wnt10b干扰载体的构建及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴子贤

作者： 吴子贤;吴静;王荣;周健;王瑞雪;刘俊阳;刘佳森;赵艳红

作者机构：

关键词： 内蒙古绒山羊;耳皮肤细胞;细胞增殖;Wnt10b;质粒构建;脂质体转染;qRT-PCR

期刊名称： 中国畜牧杂志

ISSN：

年卷期： 2021 年 005 期

页码： 203-206

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究旨在利用内蒙古绒山羊Wnt10b基因构建干扰质粒并转染耳皮肤细胞检测基因表达。以1岁龄内蒙古绒山羊为研究对象,扩增Wnt10b基因CDS序列,连接到pSGU6载体,构成pSGU6-Wnt10b重组质粒,并使用感受态细胞大量扩增提取,所得质粒转染至生长状态良好的内蒙古绒山羊耳皮肤细胞中,提取RNA利用Real Time PCR技术检测细胞中Wnt10b基因表达情况。结果显示:pSGU6-Wnt10b干扰载体经测序鉴定证明构建成功,转染至耳皮肤细胞24 h后出现绿色荧光,并在48 h后荧光强度最高,转染效率达到最大,实验组中Wnt10b mRNA表达量显著低于对照组。

分类号： S827

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