猪肺炎支原体DnaK基因的表达及ELISA方法建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘茂军

作者： 刘茂军;丁志勇;刘冬霞;杜海霞;缪芬芳;甘源;孔猛;冯志新;熊祺琰;白方方;杜改梅;邵国青

作者机构： 江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心;金陵科技学院动物科学与技术学院

关键词： 猪肺炎支原体;DnaK;重组蛋白;活性鉴定

期刊名称： 金陵科技学院学报

ISSN： 1672-755X

年卷期： 2011 年 27 卷 04 期

页码： 85-90

摘要： 猪肺炎支原体(Mhp)是猪气喘病的主要病原体。利用Mhp NJ株的DnaK基因通过SOE-PC(splicing withoverlap extension PCR)R扩增和突变,获得了目的片段并插入表达载体pET-28a(+)中,然后转入宿主菌BL21(DE3)。重组质粒经1 mmol/L IPTG在37°C温度下诱导5 h,目的蛋白可达到总蛋白的14.1%。Western Blotting证明表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体反应原性,用该重组蛋白建立的ELISA方法可检测到猪肺炎支原体抗体。此为该病基因工程疫苗抗原的筛选和ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。

分类号： S852.62

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