新城疫P蛋白磷酸化位点的质谱分析和功能鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李继红

作者： 李继红;徐腾飞;张耀丹;汪伟;孟春春;孙英杰;谭磊;宋翠萍;廖瑛;仇旭升;丁铲

作者机构：

关键词： 新城疫病毒;质谱;微型基因组;磷酸化位点

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2019 年 05 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心

摘要： 副黏病毒磷蛋白,即P蛋白(phosphoprotein),富含丝氨酸和苏氨酸,在自然条件下磷酸化水平较高。副黏病毒P蛋白的磷酸化对病毒的转录和复制具有重要的作用,但新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)P蛋白磷酸化位点及其功能依然尚不明确。本研究通过LC-MS/MS质谱对NDV La Sota病毒P蛋白的磷酸化位点进行了检测,鉴定了Ser56、Ser77、Thr78、Thr82、Ser164和Ser141六个磷酸化位点。通过在线分析,预测这些磷酸化位点的磷酸化激酶分别是PKC、CKII和GSK3。为了鉴定6个磷酸化位点的生物学功能,在已建立的表达GFP基因的NDV微型基因组质粒pTVT-LGT基础上,用荧光素酶报告基因(luciferase)替换GFP报告基因,建立了表达荧光素酶的NDV微型基因组系统。利用"丙氨酸扫描"对6个磷酸化位点进行突变后,在NDV微型基因组平台中进行功能鉴定。结果显示,T78、T82和S164位磷酸化位点的缺失显著影响了病毒RNA依赖性RNA聚合酶复合体(RNA dependent RNA polymerase,RdRp)的复制,其生物学意义有待进一步的研究。

分类号： S852.659.5

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