鸡传染性支气管炎病毒纤突蛋白的目的基因点突变对其免疫原性的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 江国托

作者： 江国托;刘思国;步志高;康丽娟;卢景良

作者机构：

关键词： 鸡传染性支气管炎病毒;免疫原基因;高变区;点突变;免疫原性

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 1999 年 03 期

页码： 249-251

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 反转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ－ Ｐ Ｃ Ｒ） 扩增鸡传染性支气管炎病毒（ Ｉ Ｂ Ｖ） 中国流行株（ Ｈ Ｄ）的主要免疫原纤突蛋白 Ｓ１ 基因（ Ｓｐｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅ） ，将其插入载体ｐ Ｕ Ｃ１８ 的 Ｂａｍ ＨⅠ／ Ｈｉｎｄ Ⅲ位点，在大肠杆菌中实现目的基因的分子克隆。经克隆化 Ｓ１ 基因的限制性酶切片段多态性（ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ）分析和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交之后，双脱氧链终止法测定其５′端高变区核苷酸序列，并以此与 Ｇｅｎｅ Ｂａｎｋ 中的参考毒株 Ｍａｓｓａｃｈｕｓｓｅｔｔｓ４１ 相应序列作比较，分析其同源性。在此基础上，分别以此两毒株抗原研制灭活疫苗，交叉免疫攻毒。结果表明，从 Ｓ１ 基因５′端高变区的起始密码子 Ａ Ｔ Ｇ 至第３５０ 位，两毒株仅在起始密码子后第１３１ 位存在一个碱基的点突变，由 Ｍ４１ 的 Ｃ 突变为 Ｈ Ｄ 株的 Ｇ，即 Ｓ１蛋白上的第４１ 个氨基酸由 Ｍ４１ 的 Ａｌａ 突变为 Ｈ Ｄ 株的 Ｇｌｙ ，二者核苷酸同源率为９９７ ％ ，氨基酸同源率为９９１ ％ 。两毒株灭活抗原疫苗免疫后的交叉攻毒试验表明， Ｍ４１ 毒株疫苗对 Ｈ Ｄ 株的保护率为７５ ％ ，而 Ｈ Ｄ 株疫苗对 Ｍ４１ 株的保护率只有６５ ％ 。

分类号： S852.65

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