利用微波-热效应进行限制性内切核酸酶反应的可行性验证

文献类型: 中文期刊

第一作者: 穆慧敏

作者: 穆慧敏;姜华;王艳丽;孙国昌

作者机构:

关键词: 酶切;微波炉;微波

期刊名称: 中国生物化学与分子生物学报

ISSN: 1007-7626

年卷期: 2012 年 28 卷 04 期

页码: 380-384

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 限制性内切酶催化的酶解反应是分子生物学实验中的常用技术.鉴于酶切反应时间长,有人提出采用微波释放的热效应催化限制性内切酶解反应,以期缩短酶解时间.但微波是否能代替传统酶切反应还需验证.本研究设计了一系列的酶切试验,验证微波酶切是否有效.结果表明:短时间(2 min)微波炉高火处理未导致DNA降解及内切酶失活.对于质粒的单酶切和部分双酶切,短时间(2 min)微波炉处理可替代水浴加热完成酶解反应.对于部分双酶切体系,微波炉处理酶切不完全,不能替代温水浴.使用微波酶解需严格控制时间,切勿时间过长.

分类号: Q78

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