H9N2亚型禽流感病毒NP蛋白纳米抗体的筛选与鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 梁世蕊

作者: 梁世蕊;吉艳红;王丹;朱启运

作者机构:

关键词: 禽流感病毒;H9N2亚型;核蛋白;纳米抗体;特性鉴定

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2023 年 010 期

页码: 1216-1222

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以H9N2亚型禽流感病毒(AIV)为研究对象,将病毒灭活纯化后免疫羊驼,测得其血清抗体效价为1∶128 000;提取羊驼外周血淋巴细胞RNA,获得单个重链可变区(VHH)基因,成功构建H9N2亚型AIV的纳米抗体噬菌体展示文库,文库库容量为1.3×10~9cfu/mL,阳性率为100%;以H9N2亚型AIV-NP蛋白为靶向抗原,利用噬菌体展示技术进行筛选,获得3株靶向H9N2亚型AIV-NP蛋白的纳米抗体;构建纳米抗体真核表达重组质粒,表达纯化后收获3株纳米抗体;通过间接ELISA、Western-blot、间接免疫荧光试验对纳米抗体的亲和力、特异性等生物活性进行鉴定,最终得到1株广谱性高亲和力的H9N2亚型AIV-NP蛋白纳米抗体,可为检测方法的建立提供新的生物材料。

分类号: S852.65

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