A型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 颜健华

作者： 兰宗宝;何奇松;蒋家霞;冯淑萍;黄胜斌;韦达有;易春华;许瑞胜

作者机构：

关键词： A型口蹄疫病毒;VP1蛋白;单克隆抗体;制备;鉴定;竞争ELISA法

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医(上半月)

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2016 年 004 期

页码： 167-171

收录情况： 北大核心

摘要： 为了深入了解VP1蛋白的结构和功能,并建立A型口蹄疫(FMD)血清抗体检测方法,试验采用纯化的重组蛋白pET-32a-VP1免疫Balb/c小鼠,以纯化的重组蛋白pGEX-6p-1-VP1作为检测抗原包被酶标板检测抗体效价.将免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,其杂交瘤细胞用间接ELISA法进行筛选,获得4株能稳定分泌抗口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1的特异性杂交瘤细胞株,分别命名为1D10、3D12、4E12和5G7.结果表明:这4株单克隆抗体均为IgM亚型和K轻链,单克隆抗体间可能识别同一个表位,或表位重叠性大.4株单克隆抗体均能被A型FMDV阳性血清所阻断,具有特异性,且以单克隆抗体4E12产生的抗体效价最高、稳定性强、亲和力最大,并能与重组蛋白FMDV-A-VP1特异性结合.说明单克隆抗体4E12可作为单克隆抗体竞争ELISA法的竞争抗体用于检测A型FMDV血清抗体.

分类号： S852.65%Q785

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