马铃薯A病毒重组CP多克隆抗体的制备及其在DAS-ELISA检测中的应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋志成

作者： 宋志成;费新敏;杨煜;乔利仙;王晶珊;李广存;郭宝太

作者机构：

关键词： 马铃薯A病毒;重组CP;多克隆抗体;酶标记抗体;DAS-ELISA检测

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2017 年 32 卷 01 期

页码： 41-46

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用重组CP作抗原制备出马铃薯A病毒的多克隆抗体,并将其用于DAS-ELISA检测。以p ET22b(+)为起始载体,构建了PVA-CP基因的原核表达载体p ET22b-ACP,重组菌BL21(p ET22b-ACP)经IPTG诱导表达出了分子量为30 k Da的特异性重组CP。利用高纯度重组CP为抗原免疫家兔,制备出了效价为1∶512 k的抗血清。以PVA重组CP为抗原,用间接ELISA与直接ELISA分别测定重组CP纯化抗体(Ig G)及其碱性磷酸酶标记物(Ig G-AP)的活性,用DAS-ELISA测定2种抗体的活性,目测及OD值测定结果表明3种ELISA测定反应都呈阳性。以PVA病毒阳性标准物为抗原,在上述3种ELISA测定中也呈阳性反应,重组CP多克隆抗体及其酶标抗体与PVA有较强的反应信号。利用重组CP制备的多克隆抗体及其酶标抗体达到了马铃薯A病毒DAS-ELISA检测的要求。

分类号： S432.41

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