环境基因组DNA脂肪酶基因克隆与分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张银波

作者： 张银波;江木兰;万霞;王汉中

作者机构：

关键词： 环境基因组;脂肪酶;简并PCR;毕赤酵母

期刊名称： 应用与环境生物学报

ISSN： 1006-687X

年卷期： 2010 年 16 卷 02 期

页码： 269-273

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立从环境基因组DNA中直接克隆脂肪酶基因的通用方法,抽提餐馆灶台油污的环境基因组DNA,采用简并PCR等分子技术从中克隆到脂肪酶基因lip42及其对应的全长cDNA.序列分析表明该基因的cDNA编码区序列全长为1692bp,编码1段由19个氨基酸残基组成的信号肽和1段由544个氨基酸残基组成的成熟肽,计算相对分子质量为61541.51,其中含有强碱性氨基酸残基42个,强酸性氨基酸残基56个,等电点pI为5.428,有2个可能的N-糖基化位点.BLAST比对分析表明该序列与已发表的白地霉(Geotrichum geotrichum)脂肪酶基因(U02541)在核苷酸水平的一致性为99%.该基因序列提交GenBank,登录号为DQ313172.将该脂肪酶基因的开放阅读框克隆到毕赤酵母表达载体,转化毕赤酵母GS115,经罗丹明B平板功能筛选得到具脂肪酶活性的重组毕赤酵母菌株[GS115(pAMB768)],验证了直接从环境基因组DNA克隆脂肪酶基因的有效性.图3表1参27

分类号： Q78

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