非洲猪瘟病毒p30蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与免疫检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 廖欣欣

作者： 廖欣欣;钟秋萍;史馨瑾;魏常青;孙海伟;刘英楠;敖清莹;谢振华;邬静;陈鸿军

作者机构：

关键词： 非洲猪瘟病毒;p30蛋白;杆状病毒表达系统

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 004 期

页码： 170-175

摘要： p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)免疫原性最强的结构蛋白之一,由CP204L基因编码.本研究利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒真核表达系统将ASFV中CP204L插入pFastBac1载体下游,将形成的重组质粒pFastBac-p30以转座子的形式插入到DH10Bac中的杆状病毒穿梭质粒(Bacmid)中,筛选出重组Bacmid-p30后,将Bacmid-p30转染Sf9细胞,并继续传代3次,获得重组杆状病毒,命名为rBac-p30.分别通过间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)鉴定了 ASFV阳性血清可特异性识别Sf9细胞中表达的p30.以此真核表达p30蛋白包被ELISA板,可区分ASFV阴阳性血清.以上结果表明,本研究初步建立了检测ASFV血清抗体的间接ELISA方法,为后续建立非洲猪瘟抗体检测方法和p30亚单位疫苗研究奠定基础.

分类号： S852.65

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