利用CRISPR/Cas9基因编辑与杂交技术靶向创制灵芝基因位点纯合突变株的方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 田佳琳

作者： 田佳琳;董蓓蓓;唐传红;周帅;冯娜;冯杰;张劲松;谭贻

作者机构：

关键词： 灵芝;双核体;基因位点纯合菌株;CRISPR/Cas9;单单杂交

期刊名称： 食用菌学报

ISSN： 1005-9873

年卷期： 2025 年 32 卷 003 期

页码： 1-12

收录情况： 北大核心

摘要： 以营养缺陷型筛选标记基因ura3为靶标，利用基于核糖核蛋白（ribonucleoprotein, RNP）的成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromic repeat/CRISPR-associated protein 9,CRISPR/Cas9)基因编辑技术，对灵芝（Ganoderma lucidum）双核菌株‘沪农灵芝1号’G0119及从其分离的2个交配亲和的单核菌株L1、L2进行基因编辑，比较单双核的编辑效率；对编辑的2个单核，进行杂交，以获得ura3被编辑的双核基因位点纯合菌株。结果表明：利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，获得G0119双核编辑株7个，经双单杂交实验鉴定，有6个G0119编辑株为L1核被编辑，1个为L2核被编辑，7个编辑株均为杂合子；获得L1、L2的单核编辑株分别为10、7个，其中L1核被编辑的效率为100%。将突变类型均为C碱基缺失的单核L1-2和L2-1编辑株以及A插入碱基的L1-5和L2-3编辑株分别进行单单杂交，获得2株ura3被破坏的双核纯合菌株。利用CRISPR/Cas9基因编辑与杂交技术靶向创制灵芝基因位点纯合菌株的方法，可为创制灵芝其他功能基因的基因位点纯合菌株提供新的方法，也可为灵芝双核菌株的基因表型分析研究提供新的途径。

分类号： S567.31

  • 相关文献

[1]灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选和分子鉴定. 周陈力,万佳宁,卢绪志,茅文俊,唐利华,吴莹莹,鲍大鹏. 2019

[2]香菇单单杂交过程中核迁移和细胞质遗传规律. 宋晓霞,章炉军,赵妍,宋春艳,李传华,陈明杰,谭琦,黄建春. 2021

[3]香菇新品种'沪香F7'. 于海龙,章炉军,宋春艳,尚晓冬,冯鹏,张美彦,谭琦. 2023

[4]利用单单杂交技术选育出平菇菌种A0713. 孙雷,许修宏,阮志勇,宋金龙,赵振. 2010

[5]香菇新品种‘沪香F7’. 于海龙,章炉军,宋春艳,尚晓冬,冯鹏,张美彦,谭琦. 2023

[6]杂交技术培育金针菇尿嘧啶营养缺陷型双核体菌株. 鲍大鹏,万佳宁,卢绪志,余养朝,张光忠,茅文俊,王莹,周陈力. 2020

[7]中国白灵侧耳自然群体的交配型因子分析. 李何静,陈强,图力古尔,黄晨阳,赵梦然,张金霞. 2013

[8]异宗配合食用真菌双核体和单核体相关概念辨析. 鲍大鹏,徐建平,潘迎捷,谭琦. 2024

[9]杨柳田头菇YAAS711菌株F1子代胞外酶活性分析. 周会明,赵永昌,柴红梅,张焱珍. 2019

[10]担子菌类食用真菌双核体生物学性质研究进展及其启迪. 鲍大鹏. 2024

[11]CRISPR/Cas9系统在水稻中的发展和利用. 沈明晨,薛超,乔中英,龚志云. 2019

[12]CRISPR/Cas9系统研究进展及应用. 王亚萍,谭玉梅,刘永翔,刘作易. 2017

[13]CRISPR/Cas9基因编辑技术在真菌中的应用. 苏文英,杨和川,谭一罗,李晓,付永平,李玉. 2019

[14]CRISPR/Cas9技术在作物基因功能研究和育种中的应用. 刘毅,张安宁,刘国兰,罗利军,余新桥. 2017

[15]CRISPR/Cas9基因编辑技术在线虫中的应用进展和展望. 曹绪文,张留所. 2018

[16]非人灵长类动物基因编辑技术的应用及挑战. 毕延震,肖红卫,张立苹,任红艳,华再东,华文君,王正,牛敏杰,林郑云,任习东,孙理华,郑新民. 2018

[17]CRISPR/Cas9介导的拟南芥TT1基因的敲除. 李麟芳,李新,肖麓. 2020

[18]基于CRISPR/Cas9技术的水稻pi21基因编辑材料的创制及稻瘟病抗性鉴定. 杨海河,毕冬玲,张玉,邹小维,高晓庆,袁正杰,曲海艳,何海燕,瞿绍洪. 2017

[19]CRISPR/Cas9介导CMAH基因敲除猪创制及繁育分析. 黄林华,李西睿,龙川,石宁宁,冯冲,杜敏杰,朱辉斌,潘登科,孙秀柱. 2018

[20]CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1基因组编辑技术在农作物基因功能中的研究进展. 聂利珍,房永雨. 2019

作者其他论文 更多>>

微信小程序