可溶性E2蛋白作为抗原的检测猪瘟病毒血清抗体间接ELISA方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 尹双辉

作者： 尹双辉;尚佑军;刘艳红;蔺芳;才学鹏;刘湘涛

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;重组E2抗原;可溶性表达;ELISA;抗体检测

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2009 年 29 卷 12 期

页码： 1529-1533

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以可溶性重组E2蛋白作为抗原,建立了猪瘟病毒(CSFV)血清抗体间接ELISA诊断方法(rE2-ELISA)。将猪瘟疫苗毒株E2基因主要抗原区(A-D)基因克隆到表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli,降低诱导温度至20℃,获得48 000大小E2融合蛋白,部分目的蛋白以可溶性形式表达。Western blotting试验证实,E2融合蛋白可以和CSFV阳性血清发生特异性结合。亲和层析纯化后的E2融合蛋白作为抗原,建立了检测CSFV血清抗体的间接rE2-ELISA方法。该方法的特异性试验结果表明,与PRRSV、PCV2、PPV和PRV阳性血清之间不存在交叉反应;用rE2-ELISA和国外同类试剂盒(CSF-Ab-Kit)检测142份田间血清样品,2种试剂盒的阳性检测率分别为83.81%和88.73%。因此,rE2-ELISA猪瘟抗体检测试剂盒具有良好的敏感性和特异性,适合应用在大规模的CSFV血清抗体的检测工作中。

分类号： S852.65

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