伊氏锥虫微环DNA的PCR扩增

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王云飞

作者： 王云飞;周勇志;钟淑梅;沈杰

作者机构：

关键词： 伊氏锥虫，动基体DNA，PCR

期刊名称： 中国兽医寄生虫病

ISSN：

年卷期： 1996 年 01 期

页码：

摘要： 伊氏锥虫是动物伊氏锥虫病的病原体，属动基体目原虫。动基体ＤＮＡ（Ｋｉｎ－ｅｔｏｐｌａｓｔＤＮＡ，简称ｋＤＮＡ）是该目原虫所特有的一种非染色体ＤＮＡ。因此，对ｋＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，即聚合酶链反应）可用于鉴定和检测伊氏锥虫。本文以５’－ＣＡＡＣＧＡＣＡＡＡＧＡＧＴＣＡＧＴ－３’，５’－ＡＣＧＴＧＴＴＴＴＧＴＧＴＡＴＧＧＴ－３’为引物，对从伊氏锥虫直接抽提的总ＤＮＡ，ｋＤＮＡ以及ｋＤＮＡ基因重组子，经ＰＣＲ扩增后，在含有０．５μｇ／ｍｌＥＢ的２％琼脂糖凝胶上电泳，紫外光检测，均显示有一条桔红色的荧光带，与ＤＮＡ分子量标准对照分析，扩增的ＤＮＡ片段分子量在６００ｂｐ以下，与实验设计的扩增片段长度相符，而总ＤＮＡ不加聚合酶反应体系和总ＤＮＡ对照均无此片段。表明实验所设计引物对伊氏锥虫微环ＤＮＡ具有特异性。本方法的建立为进一步研究我国伊氏锥虫ＤＮＡ工作打下了基础。

分类号： S852.729

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