小反刍兽疫病毒酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-tH的构建、表达和鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒙学莲

作者： 蒙学莲;朱学亮;翟军军;窦永喜;才学鹏

作者机构：

关键词： PPRV-tH;载体构建;诱饵蛋白;酵母双杂交系统

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2011 年 31 卷 04 期

页码： 509-512

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR技术扩增获得PPRV-tH基因片段,将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,经酶切、测序验证其正确插入后,将重组诱饵质粒转化酵母菌AH109中,检测其在酵母中有无渗漏、自我激活作用和毒性。利用Western blotting分析诱饵蛋白在酵母中的表达情况,以鉴定其作为诱饵蛋白的可行性。结果表明,成功扩增到了PPRV-tH,并正确构建了pGBKT7-tH诱饵表达载体,此载体在酵母细胞AH109中无毒性、渗漏和自我激活能力,且能正确表达tH蛋白。

分类号： S852.62

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