双效表达载体的构建及其U6启动子的功能效率鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 项海涛

作者： 项海涛;杨彬;温峰琴;胡永浩;柳纪省

作者机构：

关键词： RNAi;共表达载体;U6启动子;构建;鉴定

期刊名称： 生物技术通报

ISSN： 1002-5464

年卷期： 2009 年 2009 卷 04 期

页码： 82-85+90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用pBudcE4.1双表达载体构建shRNA与蛋白共表达载体,为双效疫苗的研制提供新的研究思路。以含U6启动子的载体为模板,PCR扩增得到U6启动子,用其置换载体pBudcE4.1内的CMV启动子的核心部分构建shRNA与蛋白共表达载体。用干扰绿色荧光蛋白表达的方法鉴定重组载体中的U6启动子能否启动shRNA的表达。经PCR扩增、双酶切鉴定及DNA测序证明成功构建了载体pBudcE4.1-U6。用干扰载体pBudcE4.1-U6-eGFPshRNA与含eGFP的载体共转染293T细胞后,荧光显微镜观察显示eGFP的表达量下降;流式细胞仪检测细胞的转染效率降低。研究结果证明U6启动子正常发挥作用。成功构建RNAi与蛋白共表达载体,为利用该载体研制动物双效疫苗奠定了基础。

分类号： Q78

  • 相关文献

[1]山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定. 鞠厚斌,张强,郑海学,施程洪,韩若婵,谢芳,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,朱彩珠,卫广森. 2007

[2]MADS-box基因酵母双杂交系统的构建及鉴定. 刘菊华,徐碧玉,张静,张建斌,贾彩红,金志强. 2011

[3]表达小反刍兽疫病毒H基因的山羊痘病毒通用转移载体的构建及鉴定. 邵长春,张强,吴国华,颜新敏,李健,王建科,卢晓丽,赵志荀,崔丽凡,高世功. 2009

[4]表达弓形虫TgGRA4重组腺病毒载体的构建及鉴定. 李莉,周博宇,李威,金春梅,于龙政,张厚双. 2022

[5]牛18ku-bFGF基因真核表达载体构建与鉴定. 陈绍红,刘华忠,尚江华,乐小炎. 2012

[6]橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定. 贺永国,李哲,黄绵佳,曾宪海,林位夫,刘洁琼,张春红,马晓晓. 2016

[7]绵羊肺炎支原体基因组DNA表达文库的构建与鉴定. 陈诚,乔军,孟庆玲,刘田莉,胡政香,马玉,才学鹏,陈创夫. 2016

[8]羊痘病毒P32基因与羊CD58基因共表达载体的构建. 芦晓立,张强. 2014

[9]山羊痘病毒P32基因与绵羊CD58基因共表达载体的构建及其免疫活性分析. 芦晓立,吴国华,颜新敏,张强. 2015

[10]狗尾草U6启动子的克隆及功能鉴定. 郭静远,赵辉,屈静,张丽丽,郭安平. 2021

[11]甘薯U6启动子克隆及其转录活性分析. 唐维,后猛,宋炜涵,闫会,王欣,李臣,高闰飞,张允刚,李强. 2024

[12]茄子U6启动子克隆及CRISPR/Cas9介导的基因编辑体系建立. 王丹,王谧,刘军,周晓慧,刘松瑜,杨艳,庄勇. 2022

[13]苹果U6启动子的克隆及功能分析. 卞书迅,韩晓蕾,袁高鹏,张利义,田义,张彩霞,丛佩华. 2019

[14]大豆多基因编辑表达载体的构建及应用. 陈向前,姜奇彦,孙现军,牛风娟,张慧媛,胡正,张辉. 2022

[15]马铃薯Y病毒CP基因RNAi载体构建与干涉效果测定. 李奇科,陶刚,邱又彬,邱礽,迟胜起,朱英,刘作易. 2009

[16]干扰环阿乔醇合成酶基因的表达对人参皂苷含量的影响. 赵寿经,安岩,孟洋,何沐阳,曲庆玲,郝东云. 2014

[17]DHAR与草莓AsA积累关系及DHAR RNAi遗传转化研究. 张丙秀,李柱刚,高媛,刘丹,高庆玉. 2012

[18]飞蝗表皮蛋白Obstructor家族基因的分子特性及基于RNAi的功能分析. 王燕,李大琪,刘晓健,李涛,马恩波,范仁俊,张建珍. 2015

[19]饲喂CYP6CM1和Coe1 RNAi双价转基因烟草对Q型烟粉虱抗药性的影响. 常蕾,胡雪虹,杨郁文,陈天子,邓惠清,姜利农,刘正銮,张保龙,王荣富. 2013

[20]RNAi技术及其在畜牧业中的应用前景. 仲明,张宏福,董枫岚,孙绍光,王润平,杨琳. 2006

作者其他论文 更多>>

微信小程序