猪水泡病病毒HK/70株全长cDNA分子克隆感染性的鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郑海学

作者： 郑海学;刘湘涛;尚佑军;吴锦艳;白兴文;靳野;孙世琪;冯霞;田宏;郭慧琛;郭建宏;刘在新;常惠芸;马军武;谢庆阁

作者机构：

关键词： 猪水泡病病毒;全长cDNA;感染性克隆;体外转录本;反向遗传学

期刊名称： 科学通报

ISSN： 0023-074X

年卷期： 2006 年 51 卷 16 期

页码： 1900-1905

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了鉴定猪水泡病病毒(SVDV)HK/70株的全长cDNA分子的感染性,以所构建的SVDVHK/70株的全长cDNA分子为模板,应用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,将获得的RNA用脂质体转染法导入IBRS-2细胞,传代培养,观察到典型的SVDV致细胞病变效应.反向血凝鉴定、间接免疫荧光、RT-PCR及序列测定结果表明,从猪水泡病病毒全长cDNA拯救出了猪水泡病病毒(pSVDV).用电子显微镜观察了pSVDV的形态,测定了pSVDV的TCID50和LD50,并与亲本毒进行了比较,结果显示,pSVDV与亲本毒的毒力差别不显著.结果表明,猪SVDVHK/70的感染性cDNA克隆已经成功构建,为进一步探索SVDV病毒致病的分子机制及研制新型SVD疫苗奠定了良好的基础.

分类号： S852.65

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