H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶蛋白在昆虫细胞中的表达与鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张洁
作者: 张洁;崔鹏飞;张元成;邢鑫;王丛丛;颜成;王燕;陈源;朱春成;缪葭皓;陈素娟;邓国华;陈化兰
作者机构:
关键词: 禽流感病毒;杆状病毒表达系统;N1蛋白;血清抗体
期刊名称: 中国家禽
ISSN: 1004-6364
年卷期: 2024 年 46 卷 011 期
页码: 40-44
收录情况: 北大核心
摘要: 研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒(AIV)的神经氨酸酶(NA)蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白,将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1,构建的重组转移载体pFastBac1-N1转化至DH10Bac感受态细胞,经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1,然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞,获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示:N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达,并且该重组蛋白具有良好的反应原性,能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应,其仅能识别N1亚型鸡血清,特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白,为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。
分类号: S852.65
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