绵羊GSTA2基因克隆、生物信息学分析及真核表达载体构建
文献类型: 中文期刊
第一作者: 邱丽霞
作者: 邱丽霞;林秀;曹忻;杨华;杨永林;余乾;张文喆
作者机构:
关键词: 绵羊;GSTA2基因;克隆;生物信息学;真核表达载体
期刊名称: 中国草食动物科学
ISSN: 2095-3887
年卷期: 2024 年 002 期
页码: 1-9
摘要: 为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2(Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2)基因功能,利用牛GSTA2基因序列设计引物,提取绵羊皮肤组织总RNA,应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究,构建真核表达载体,转染绵羊皮肤成纤维细胞,应用qPCR技术检测GSTA2基因的表达。结果表明,克隆到绵羊GSTA2基因672 bp编码区序列(GenBank登录号:OR440604.1),编码223个氨基酸,分子量为25.39 ku。氨基酸比对和系统进化树分析表明,绵羊与牛的GSTA2相似度最高,达87.39%。GSTA2的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pcDNA3.1-GSTA2转染绵羊皮肤成纤维细胞后,GSTA2基因表达量极显著上调(P <0.001)。说明成功克隆了绵羊新基因GSTA2的CDS序列,并成功构建了其真核表达载体。
分类号: S826
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