利用TALENs技术建立基因定点修饰的猪Oct-4-EGFP细胞系

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘畅

作者： 刘畅;冯冲;宋志强;李西睿;王宁;储明星;潘登科

作者机构：

关键词： Oct-4-EGFP;TALENs;同源重组;猪;干细胞;多能性

期刊名称： 中国畜牧兽医

ISSN： 1671-7236

年卷期： 2013 年 40 卷 11 期

页码： 1-6

收录情况： 北大核心

摘要： 本研究旨在建立一个用于干细胞示踪的报告体系,将EGFP cDNA及两侧带有LoxP位点的neo抗性基因插入五指山小型猪内源性Oct-4基因的终止密码子处,以Oct-4基因完整的5′调控区启动EGFP的表达,为猪干细胞研究提供有价值的工具。试验定制了针对猪Oct-4终止密码子的TALENs,与打靶载体共转染猪耳成纤维细胞,药物筛选得到抗性克隆点514个,经过PCR鉴定,共获得杂合阳性克隆点36个,打靶效率分别为5.6%和13.0%。本研究成功获得了Oct-4-EGFP转基因细胞系,并证明了TALENs技术可以明显提高同源重组效率。

分类号： S828

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