文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘畅
作者: 刘畅;冯冲;宋志强;李西睿;王宁;储明星;潘登科
作者机构:
关键词: Oct-4-EGFP;TALENs;同源重组;猪;干细胞;多能性
期刊名称: 中国畜牧兽医
ISSN: 1671-7236
年卷期: 2013 年 40 卷 11 期
页码: 1-6
收录情况: 北大核心
摘要: 本研究旨在建立一个用于干细胞示踪的报告体系,将EGFP cDNA及两侧带有LoxP位点的neo抗性基因插入五指山小型猪内源性Oct-4基因的终止密码子处,以Oct-4基因完整的5′调控区启动EGFP的表达,为猪干细胞研究提供有价值的工具。试验定制了针对猪Oct-4终止密码子的TALENs,与打靶载体共转染猪耳成纤维细胞,药物筛选得到抗性克隆点514个,经过PCR鉴定,共获得杂合阳性克隆点36个,打靶效率分别为5.6%和13.0%。本研究成功获得了Oct-4-EGFP转基因细胞系,并证明了TALENs技术可以明显提高同源重组效率。
分类号: S828
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