鸭瘟病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 万春和

作者： 万春和;刘荣昌;陈翠腾;程龙飞;施少华;傅光华;陈红梅;傅秋玲;黄瑜

作者机构：

关键词： 鸭瘟病毒;gE基因;TaqMan探针;实时荧光定量PCR方法

期刊名称： 福建农林大学学报(自然科学版)

ISSN： 1671-5470

年卷期： 2018 年 47 卷 06 期

页码： 722-728

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据鸭瘟病毒(DEV) gE基因的特征,设计特异性引物和探针,经条件优化后,建立检测DEV的TaqMan实时荧光定量PCR方法.结果表明:当gE基因含量为1.0×10~1～1.0×10~6拷贝·μL~(-1)时,建立的实时荧光定量PCR检测方法有良好的线性扩增,其标准曲线方程为:y=-3.480x+37.955,扩增相关系数为0.999;敏感性强,最低检测限为10拷贝·μL~(-1);特异性好,仅对DEV强毒株和弱毒活疫苗株检测到阳性扩增信号,对鸭源其他传染病病原(番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭腺病毒A型、鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒、新型鸭呼肠孤病毒、H9N2亚型禽流感病毒、禽1型副粘病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌)检测均为阴性;重复性好,组内变异系数和组间变异系数分别为0.62%～1.14%和0.69%～2.40%.对临床送检疑似DEV感染的14份样品进行检测,并与常规PCR方法、病毒分离鉴定进行比较,阳性率分别为85.71%(12/14)、71.43%(10/14)和57.14%(8/14);且与常规PCR方法、病毒分离鉴定的阳性符合率均为100%.本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法,可用于开发DEV快速诊断试剂盒,用于开展DEV流行病学调查.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]鸭腺病毒A型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立. 万春和,刘荣昌,程龙飞,施少华,傅光华,陈红梅,傅秋玲,黄瑜. 2018

[2]鸭瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用. 于江玮,程慧敏,林健,杨宝琳,黄程,杨志远,胡格. 2025

[3]鸭肠炎病毒疫苗株EvaGreen实时荧光定量PCR方法的建立. 万春和,刘荣昌,程龙飞,傅光华,施少华,陈红梅,傅秋玲,黄瑜. 2018

[4]猪细环病毒k2型SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立. 陈如敬,黄秋宇,修金生,吴学敏,严山,车勇良,周伦江. 2016

[5]鹅圆环病毒TB Green实时荧光定量PCR方法的建立及初步应用. 赵敏,李家玉,黄瑜,万春和. 2022

[6]羊巴贝斯虫TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立. 刘爱红,关贵全,刘军龙,谢俊仁,李有全,殷宏,罗建勋. 2015

[7]禽坦布苏病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立. 万春和,陈翠腾,傅秋玲,程龙飞,傅光华,陈红梅,施少华,黄瑜. 2016

[8]猪伪狂犬病毒野毒株SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR诊断试剂盒的研制. 余波,周思旋,谭诗文,徐景峨,史开志,杨莉. 2014

[9]猪伪狂犬病病毒山东分离株gE和gD基因的克隆及序列分析. 张玲玲,时建立,彭喆,徐胜男,郑书轩,吴晓燕,徐绍建,王金宝,李俊. 2017

[10]伪狂犬病病毒LAMP检测方法的建立与应用. 郑书轩,徐胜男,时建立,彭喆,徐绍建. 2017

[11]区分猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗株和野毒株的gE-PCR方法的建立. 张莉,丁伯良,王英珍,鄢明华. 2008

[12]利用杆状病毒表达系统表达PRV/gE蛋白及间接免疫荧光抗体(IDF)检测方法的建立. 朱和超,梁婉,范桂芳,彭忠,华琳,汤细彪,陈焕春,吴斌. 2019

[13]猪伪狂犬病病毒野毒LNA探针real-time PCR检测方法的建立. 李艳,楚品品,雷雯,勾红潮,蒋智勇,蔡汝健,宋帅,卞志标,杨东霞,李春玲. 2021

[14]伪狂犬病毒GDSH株的分离鉴定及gE基因的序列分析. 白丽丽,王旭荣,刘建营,陈德坤,张春红,宋长绪. 2008

[15]牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白单抗的制备及鉴定. 于作,朱远茂,高欲燃,董秀梅,吕闯,薛飞. 2010

[16]I型牛疱疹病毒gE基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法建立. 张晓锋,翁永刚,陈冈,李守富,郭海,叶结平,范红结,陈鸿军. 2018

[17]山西猪伪狂犬病毒gE基因主要抗原区的遗传变异分析. 孟帆,樊振华,吴忻,姚敬明,王娟萍,米瑞娟,薛翼鹏,赵岳. 2017

[18]牛疱疹病毒1型gE蛋白胞外区基因的杆状病毒表达及其表达产物的免疫反应性. 姜良,黄秀芬,王天坤,刘杉杉,李永清. 2014

[19]伪狂犬病病毒上海株gE基因克隆及其含GFP基因质粒载体的构建. 姜焱,汪海健,祁贤,叶向阳,陈溥言. 2001

[20]I型牛疱疹病毒gE基因TaqMan探针荧光定量PCR检测方法建立. 张晓锋,翁永刚,陈冈,李守富,郭海,叶结平,范红结,陈鸿军. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序