温郁金SRAP-PCR反应体系建立及条件优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 王晓慧
作者: 王晓慧;吴亮;姜程曦
作者机构:
关键词: 温郁金;基因组DNA;SRAP-PCR反应体系;SRAP分子标记;遗传多样性
期刊名称: 中草药
ISSN: 0253-2670
年卷期: 2016 年 47 卷 14 期
页码: 2515-2518
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 目的研究温郁金Curcuma wenyujin的SRAP-PCR扩增体系最适宜的条件。方法以提取纯化温郁金基因组DNA为模板,利用PCR扩增技术,对SRAP反应中主要影响因素Mg2+浓度、d NTP浓度、模板DNA质量浓度、引物浓度、Taq聚合酶浓度进行优化。结果根据实验确定的最佳体系为25μL SRAP反应体系,其中Mg2+2.0 mmol/L,Taq聚合酶2.0 U,引物浓度1.6μmol/L,模板DNA 0.4 ng/μL,d NTP 2.0 mmol/L,10×PCR缓冲液2.5μL。结论通过扩增条件优化实验,扩增的产物条带清晰明亮、重复性好,确定的反应体系及反应程序适用于温郁金的SRAP分子标记,为今后温郁金的遗传多样性研究奠定了基础。
分类号: S567.239
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