文献类型: 中文期刊
第一作者: 叶兴国
作者: 叶兴国;王艳丽;康乐;杜丽璞;徐惠君
作者机构:
关键词: 小麦;农杆菌转化;基因型筛选;瞬时表达;分子检测
期刊名称: 作物学报
ISSN: 0496-3490
年卷期: 2005 年 31 卷 12 期
页码: 1552-1556+1689
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 利用C58c1农杆菌菌株(其携带的pPTN290质粒载体上含有nptⅡ基因和GUS基因)为供体材料和小麦幼胚为受体材料,对我国35个春小麦基因型进行了农杆菌敏感性研究和转化研究。组织化学染色结果表明,PM97034、P187、巴140105、扬麦158、新春9号和克丰6号等基因型农杆菌感染后GUS,基因瞬时表达率达到了15.0%~30.0%,显著高于模式基因型Bobwhite。其余幼胚分别在含10~25mg/LG418培养基上诱导愈伤组织和分化植株,抗性再生植株经ELISA检测、PCR检测、叶片离体退绿检测、XGluc染色检测和Southernblot检测,最终从新春9号、PM97034和Bobwhite获得了转基因植株,转化效率分别为3.3%、2.0%和1.1%,新春9号和PM97034的农杆菌转化效率高于Bobwhite。Southernblot检测结果同时表明,外源基因在多数转基因植株中表现为单拷贝整合。T1代植株ELISA检测结果和PCR检测结果表明,外源基因在个别株系中的分离符合孟德尔遗传规律,而在多数株系中的分离偏离了孟德尔遗传规律。阳性植株与阴性植株分离比经χ2c适合性检测,表明外源基因在多数株系中的遗传符合3∶1分离规律。本文首次对不同小麦基因型进行了农杆菌敏感性和转化效率研究,筛选到新春9号和PM97034两个对农杆菌比较敏感且转化效率比较高的基因型,可望广泛用于小麦转基因研究。
分类号: S512.1
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