梨黑斑病抗病相关基因PpEMS1的克隆与分析

文献类型: 中文期刊

第一作者: 段敏杰

作者: 段敏杰;伊洪伟;王进;武峥

作者机构:

关键词: 梨;PpEMS1;SouthernBlot;荧光定量PCR;亚细胞定位

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2019 年 35 卷 011 期

页码: 16-21

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 克隆梨抗病相关基因,并对其在梨黑斑病抗病防御中的作用进行初步分析.基于同源基因克隆方法从"黄冠梨"中克隆获得一个预测为受体样蛋白激"酶EMS1的基因,暂命名为PpEMS1.利用生物信息学、Southern Blot、亚细胞定位和实时荧光定量PCR技术对该基因进行分析.结果表明,该基因CDS全长3894 bp,编码1296个氨基酸,开放阅读框3891 bp.Southern Blot分析表明,在"黄冠梨"、"黄花梨"、"翠玉梨"中,该基因都以单拷贝形式存在,在"爱宕梨"中以多拷贝形式存在.亚细胞定位结果显示,融合蛋白在细胞膜和细胞核均有表达.荧光定量PCR分析表明,接种黑斑病菌1、2、3、4、5、6、7和8 d后,在"黄花梨"和"爱宕梨"中该基因表达均呈现先上升后下降的趋势.推测该基因可能与梨黑斑病抗性相关.

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