稳定表达流感病毒PR8株NS1蛋白MDCK细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张旭

作者： 张旭;滕巧泱;闫丽萍;周洁文;徐大伟;颜丕熙;姬希文;戴晓光;王洪斌;高利;李泽君

作者机构：

关键词： 流感病毒;NS1基因;MDCK

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2011 年 19 卷 02 期

页码： 8-12

摘要： 根据流感病毒A/Puerto Rico/8/34株NS1基因的核苷酸序列设计引物,PCR扩增后,将NS1完整开放阅读框分别克隆于pMX载体和PET30a载体,成功构建了pMX-PR8-NS1和PET-PR8-NS1重组质粒。将PET-PR8-NS1重组质粒转化Jm109感受态大肠杆菌,诱导表达获得重组NS1蛋白免疫小鼠制备多抗血清。同时,将逆转录病毒载体系统pMX-PR8-NS1、pCI-NF-KB、PMDSV和MDSV共转染293T细胞,制备逆转录病毒样粒子。将逆转录病毒样粒子感染MDCK细胞,利用嘌呤霉素进行抗性筛选。然后经过PCR、RT-PCR、间接免疫荧光鉴定,获得稳定表达PR8病毒NS1蛋白的细胞系,将之命名为MDCK-PR8-NS1细胞系。该细胞系的建立有望为深入开展流感病毒NS蛋白生物学功能的研究以及为扩增NS1基因删除的流感病毒提供了有利的工具。

分类号： S852.659.5

  • 相关文献

[1]中兽药复方对H9N2亚型禽流感病毒的抑制作用研究. 黄庆华,谢浩东,孙世平,孙守礼,崔宁,许传田,成炳才,李文峰,李建和,李超. 2021

[2]稳定表达甲型流感病毒M1蛋白的MDCK细胞系的建立. 张旭,滕巧泱,周洁文,徐大伟,颜丕熙,姬希文,闫丽萍,戴晓光,张树梅,王洪斌,李泽君. 2011

[3]利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究. 邵玉乐,许曼,王辉,曾为俊,鲁国涛,赵丽丽,陈洪岩,刘建华,孟庆文. 2019

[4]基于CRISPR/Cas9技术构建犬IRGM4、IRGM5和IRGM6基因敲除的MDCK细胞系. 徐广军,曹世诺,郑君,张险峰,贾洪林,郑永辉. 2017

[5]猪细小病毒NS1基因低温诱导表达及间接ELISA方法的建立. 臧科伟,张春玲,邹勇,柴家前,崔言顺. 2009

[6]猪细小病毒SY－99株非结构蛋白NS1基因的克隆及序列分析. 吴丹,仇华吉,李昌文,薛强,周艳君,李景鹏,韩孝成,刘慧敏,童光志. 2002

[7]西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定. 马健男,杨涛,王群,张维军,徐青元,田野,林燕,宋红梅,步志高,吴东来. 2009

[8]猪细小病毒LXB-PPV-20-06株NS1基因的原核表达及免疫活性的鉴定. 戚亭,崔尚金,张超范. 2008

[9]马乙型脑炎病毒NS1基因的原核表达及抗原性鉴定. 田志革,郭巍,赵立平,李红梅,曲娟娟. 2011

[10]H9N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆表达及反应原性分析. 王方昆,袁秀芳,王一成,张存,徐丽华,刘思当. 2008

[11]日本脑炎病毒NS1基因在大肠杆菌中的高效表达. 金吉东,仇华吉,田志军,周艳君,张守发,童光志. 2003

[12]H5N1亚型高致病性禽流感病毒NS基因的克隆及序列分析. 杨涛,刘明,张云,杜绍范. 2005

[13]猪流感病毒(A/swine/Jiangsu/2/2006(H3N2))NS1基因表达产物分析. 郭林,王晓杜,刘庆伟,沈阳,邱亚峰. 2009

[14]禽坦布苏病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立. 万春和,陈翠腾,傅秋玲,程龙飞,傅光华,陈红梅,施少华,黄瑜. 2016

[15]日本脑炎病毒WHe株NS1基因的克隆、测序及表达. 乔宪凤,唐青海,郑新民,熊忠良,刘西梅,华文君,周荆荣,何维明. 2007

[16]H17N10亚型蝙蝠流感病毒NS1蛋白的表达及其特性. 许凯迪,高俊娜,侯天龙,刘芹防,李泽君. 2016

[17]水貂肠炎病毒B株全基因克隆与序列分析. 陈涛,赵建军,张海玲,吴威,钱爱东,闫喜军. 2010

[18]禽坦布苏病毒NS1基因的原核表达. 潘异哲,万春和,黄瑜,程龙飞,傅光华,施少华,陈红梅. 2013

[19]NS2A序列不利于日本脑炎病毒NS1基因的体外表达. 仇华吉,金吉东,田志军,周艳君,王云峰,童光志. 2002

[20]水貂肠炎病毒NS1基因进化分析. 张海玲,张蕾,胡博,白雪,赵建军,刘昊,徐淑娟,苗立光,冯卓,闫喜军. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序