香蕉束顶病毒Rep蛋白特性分析及纯化体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 余乃通

作者： 余乃通;张雨良;王健华;刘志昕

作者机构：

关键词： 香蕉束顶病毒;Rep蛋白;特性分析;纯化体系;建立

期刊名称： 中国农业科技导报

ISSN： 1008-0864

年卷期： 2011 年 13 卷 02 期

页码： 31-37

收录情况： CSCD

摘要： 以香蕉束顶病毒海口分离物DNA1(Accession NO.FJ463042)的Rep蛋白为研究对象,利用生物信息学软件对该蛋白的理化性质、结构组成、信号肽、磷酸化、二级结构、三级结构与功能结构域等作了较为详细的分析与预测,并配置了相关纯化试剂。将含重组质粒pET32b-Rep的E.coli BL21(DE3),接种到LB液体培养基,在20℃、0.1 mmol/L IPTG条件诱导4 h,产生大量的可溶性重组蛋白,经AKTA Explorer100系统亲和层析柱后,用不同梯度的Washing buffer洗脱杂蛋白并对各阶段产物进行12%SDS-PAGE分析,确定了100mmol/L咪唑的Washing buffer洗脱浓度,最终获得大量高纯度的重组蛋白。以His*Tag Monoclonal Antibody为一抗,Western blot鉴定结果表明纯化重组蛋白即为His-Rep融合蛋白。该纯化体系的建立为研究BBTVRep蛋白的结晶奠定了基础,也为今后ABTV、FBNYV、MVDV、PNYDV等病毒的相关复制蛋白纯化提供了重要数据。

分类号： S436.68

  • 相关文献

[1]猪圆环病毒2型ORF1部分位点突变对病毒复制能力的影响. 李荷然,肖琦,温立斌,朱雪蛟,芮荣,何孔旺. 2024

[2]猪圆环病毒2型Rep蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 高梅,彭喆,吴晓燕,时建立,辛长勋,郑书轩,刘玉伟,王硕,王金宝,李俊. 2018

[3]猪圆环病毒4型Rep蛋白原核表达及多克隆抗体制备. 陈如敬,吴学敏,陈秋勇,严山,吴仁杰,车勇良,王隆柏,周伦江. 2023

[4]新型番鸭细小病毒Rep蛋白羧基端亚片段的原核表达及多克隆抗体制备. 胡非凡,梁齐章,黄瑜. 2023

[5]猪圆环病毒2型Rep蛋白基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立. 李文良,毛立,张纹纹,王小敏,茅爱华,甘源,江杰元. 2013

[6]PCV2 Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响. 徐胜男,时建立,彭喆,徐绍建,吴晓燕,丛晓燕,杜以军,吴家强,李俊. 2015

[7]香蕉束顶病毒海南分离物DNA组分的克隆及序列分析. 田娥,庄军,刘志昕. 2004

[8]香蕉分化芽BBTVDAS-ELISA检测方法的建立和应用. 周朋,余乃通,章绍延,王健华,胡加谊. 2014

[9]香蕉两种主要病毒多重PCR检测方法的建立. 彭军,王国芬,黄俊生,代鹏,谢玉萍,李伟东. 2006

[10]香蕉束顶病毒研究新进展. 余乃通,刘志昕. 2011

[11]香蕉束顶病毒单克隆抗体的制备及其应用. 孙茂林,和春育,庄俊英,王宪焘,陈利,李迅东,唐恩华. 1992

[12]香蕉束顶病毒海口分离物核穿梭蛋白(NSP)的纯化及抗血清制备. 余乃通,冯团成,王建华,刘志昕. 2010

[13]香蕉束顶病毒海口分离物Rb蛋白的原核表达、纯化及多克隆抗血清制备. 冯团诚,余乃通,刘志昕. 2010

[14]香蕉束顶病毒海口分离物基因组的克隆及序列分析. 冯团诚,王健华,刘志昕. 2010

[15]感染BBTV香蕉叶片cDNA文库的构建及评价. 谭老喜,张雨良,周朋,章绍延,王健华,张秀春,刘志昕. 2013

[16]香蕉束顶病毒海口分离物NSP基因的原核表达. 冯团诚,王健华,刘志昕. 2009

[17]香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备. 赵焕阁,牛胜鸟,彭存智,刘志昕. 2008

[18]香蕉束顶病毒DNA组分的克隆及其重要特征序列分析(英文). 黄永红,梅眉,曾继吾,周碧容,吴元立,夏瑞,易干军. 2008

[19]香蕉束顶病毒的提纯. 叶旭东,杨辉,吴如健,陈景耀,柯冲. 1993

[20]利用超低温保存方法脱除香蕉束顶病毒的研究. 曾继吾,牛王翠,黄永红,孙中海,黄秉智,易干军,周碧容. 2009

作者其他论文 更多>>

微信小程序