猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA2.5kb基因片段的分子克隆及其表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邵美丽

作者： 邵美丽;刘思国;王春来;郭洋;张秀华;郭设平;佟恒敏

作者机构：

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌;ApxⅣA基因;融合表达;猪

期刊名称： 中国兽医科技

ISSN： 1000-6419

年卷期： 2005 年 35 卷 07 期

页码： 525-528

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清1型国内分离株721株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出ApxⅣA基因2.5kb特异片段,将其克隆于pMD18T中,经酶切鉴定筛选重组质粒后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中登录的血清1型ApxⅣA(AX002405)基因进行比较,结果显示核苷酸同源性为99.5%。将该片段亚克隆到原核表达载体pGEX6P1的EcoRⅠ/SalⅠ位点,成功地构建了重组表达载体pGEXapxⅣA,并转化大肠埃希氏菌BL21,获得了表达。SDSPAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为117ku,与预期片段大小相符;Westernblotting分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。

分类号： S852.61`Q785

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