鸡MHCⅠα和β2m的原核表达与多克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
第一作者: 戴银
作者: 戴银;王承志;刘生杰;沈学怀;赵瑞宏;胡晓苗;张丹俊
作者机构:
关键词: 鸡MHCⅠ类分子;原核表达;多克隆抗体
期刊名称: 动物医学进展
ISSN: 1007-5038
年卷期: 2016 年 37 卷 05 期
页码: 38-42
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为制备MHCⅠ基因工程疫苗的基础材料,构建了鸡MHCⅠ分子重组质粒并进行原核表达,进而制备鸡MHCⅠ分子的多克隆抗体。应用PCR方法,克隆鸡MHCⅠα和β2m基因,构建重组载体pETMHCⅠα和pET-MHCⅠβ2m,经PCR、双酶切和测序鉴定后,将重组质粒在大肠埃希菌Rosetta中进行诱导表达,融合蛋白纯化后,接种昆明小鼠制备多克隆抗体,血清稀释后用免疫印迹法(Western blot)分析。结果表明,鸡MHCⅠα和β2m基因在大肠埃希菌中成功表达,融合蛋白分子质量分别约为52.1ku和33.0ku;制备的鼠抗鸡MHCⅠα和β2m链多克隆抗体,经Western blot检测证实抗体特异性较强,可进一步用于鸡MHCⅠ分子的研究。
分类号: S852.4
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