鲁氏耶尔森菌qPCR快速检测方法的建立和应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张枭

作者： 张枭;李绍戊;王荻;曹永生;卢彤岩

作者机构：

关键词： 鲁氏耶尔森菌;rupA基因;实时荧光定量PCR;肠炎红嘴病;鲑科;虹鳟

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2017 年 24 卷 06 期

页码： 1254-1260

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 鲁氏耶尔森菌(Yersinia ruckeri)是导致虹鳟(Oncorhynchus mykiss)肠炎红嘴病的病原。本研究以鲁氏耶尔森菌毒力因子rup A基因为靶标设计1对特异性引物,以含有rup A基因部分序列的重组质粒为标准品构建标准曲线,优化建立检测鲁氏耶尔森菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法,并对腹腔注射鲁氏耶尔森菌菌悬液的虹鳟肝、肾、脾、血液样品进行检测。结果显示,设计的引物具有良好的种间特异性,标准曲线线性方程为y=–3.3766x+40.012(R~2=0.9958);最低检测限为57 copy/μL,较常规PCR的灵敏度高出约100倍。应用检测结果表明,本方法可准确检测被鲁氏耶尔森菌感染的虹鳟样品。研究表明,所建立的qPCR方法具有特异、灵敏、快速、定量的优点,可用于快速诊断虹鳟肠炎红嘴病早期病症及定量检测鲁氏耶尔森菌。

分类号： S943

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