烟草染色体制备体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

第一作者: 韩梦荞

作者: 韩梦荞;吴疆;李丽华;王昭懿;邓习;韦凤杰;任民;孙洋洋;李富欣

作者机构:

关键词: 烟草;染色体制备;酶解法;种质资源;染色体工程

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2025 年 41 卷 003 期

页码: 44-50

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】开发一套适合烟草的染色体制备体系,为推进烟草染色体工程以及远缘杂交研究的系统开展奠定基础。【方法】以普通烟草为供试材料,利用酶解法进行染色体制备体系的构建。试验针对根尖组织8个时间段进行采样;利用4种方法进行预处理,包括对照(前期无任何处理)、20%风油精室温处理2 h、冰水混合物0℃处理48 h以及N2O处理,其中,N2O处理又分为20–70 min每间隔10 min取一次样;根尖样品分别在35、45和55 min不同时间下进行酶解。对每种处理方法或时长均进行了染色体制备并观察,根据染色体长度、清晰度及分散程度鉴定烟草染色体制备最佳方法。整合优化后的处理方法和时长,形成烟草染色体制备方法,并通过制备不同类型烟草品种的染色体样品进行体系的适用性验证。【结果】10∶30–12∶30为烟草根尖取样的理想时间,N2O预处理30–40 min,酶解45 min较为适宜,并利用该优化体系应用于普通烟草祖先种、普通烟草、远缘杂交衍生后代3个不同种质资源,均获得高质量染色体样品。【结论】建立了适用于烟草染色体的制备体系。利用该体系可在3 h内完成从烟草根尖取样到制备出合格的染色体样品。

分类号: S572

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