高粱花叶病毒Hcpro、CP和PIPO基因酵母双杂交载体构建及自激活验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张雨良

作者： 张雨良;黄启星;张树珍;王健华;余乃通;刘志昕

作者机构：

关键词： 高粱花叶病毒;Hcpro;CP;PIPO;酵母双杂交;诱饵载体

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2012 年 33 卷 12 期

页码： 2252-2256

收录情况： CSCD

摘要： 采用同源克隆技术获得侵染甘蔗高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、CP、PIPO基因片段。将该基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定,证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导入Y2H Gold酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性。含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用。研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高粱花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供基础。

分类号： S432.41

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