非变性原位杂交技术在芝麻染色体识别上的探索与应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘艳阳
作者: 刘艳阳;崔承齐;梅鸿献;武轲;郑永战
作者机构:
关键词: 芝麻;寡聚核苷酸;染色体;核型;ND-FISH
期刊名称: 中国农业科学
ISSN: 0578-1752
年卷期: 2013 年 46 卷 17 期
页码: 3729-3735
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 【目的】研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件,并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索。【方法】以寡聚核苷酸(AC)8为探针,研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响,确定芝麻ND-FISH最优试验方案。【结果】芝麻ND-FISH最优方案:制片在浓度100μg·mL-1RNase A酶解1h,探针浓度6μL(20 ng·μL-1),杂交4 h,4×SSC/0.2%Tween 20溶液洗脱10 min;18条染色体存在(AC)8杂交信号,其中,14条染色体上存在较强杂交信号,4条染色体上有较弱杂交信号,结合染色体长度及臂比,18条染色体可有效识别。【结论】利用ND-FISH技术、以(AC)8为探针成功识别栽培芝麻的18条染色体。
分类号: S565.3
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