水稻CRISPR/Cas12a系统的优化及其介导的腺嘌呤碱基编辑器的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王敬文

作者： 王敬文;严芳;柳浪;周雪平;王道文;周焕斌

作者机构：

关键词： CRISPR;Cas12a;腺嘌呤碱基编辑器;水稻

期刊名称： 生物技术通报

ISSN：

年卷期： 2021 年 006 期

页码： 279-285

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了构建高效的CRISPR/Cas12a介导的水稻基因编辑系统,通过测试不同来源的Cas12a蛋白、crRNA长度和构型来探索影响Cas12a编辑活性的因素发现,相对于AsCas12a和LbCas12a在crRNA为23 nt时具有更高的编辑效率,并且crRNA 3’端的U4AU4结构并不能增强其在水稻中的编辑活性,同时利用大肠杆菌腺嘌呤脱氨酶变体TadA8e开发了CRISPR/LbCas12a介导的腺嘌呤碱基编辑系统pUbi∶rBE58,成功地将水稻内源基因OsCPK15实现A到G替换（A>G）,其效率为33.33%。本研究证明了利用CRISPR/Cas12a可以对水稻基因组进行编辑,丰富了水稻基因编辑工具,拓宽了基因编辑工具箱。

分类号： S511%Q943.2

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