小麦TaMAPK2激酶基因的原核表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘沛

作者： 刘沛;徐兆师;晏月明;李连城;陈明;马有志

作者机构：

关键词： 小麦;MAPK蛋白激酶;原核表达;蛋白纯化;多克隆抗体

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2011 年 12 卷 01 期

页码： 92-95+102

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： MAPK蛋白激酶是一类重要的植物胁迫信号调控因子。为了研究小麦MAPK基因的功能,本试验克隆了小麦MAPK蛋白激酶基因TaMAPK2。为了制备TaMAPK2基因的多克隆抗体,TaMAPK2的非保守区段的DNA序列anti-MAPK2被构建到原核表达载体pET-28a-(+)上,表达融合蛋白His-antiMAPK2。在终浓度为1mmol/L IPTG诱导1h的条件下,融合蛋白His-antiMAPK2表达量达到最大。通过蛋白标记亲和层析柱(HisTrapTMHP)得到纯化的His-antiMAPK2融合蛋白。利用新西兰大白兔制备了TaMAPK2基因的多克隆抗体,ELISA竞争抑制法检测抗体效价检测,效价为1:80000,能满足后续试验要求的效价值,为进一步分析TaMAPK2的蛋白定位、表达等提供基础。

分类号： Q943.2

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