狂犬病病毒糖蛋白膜外区密码子优化、原核表达及纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 鞠美芳

作者： 鞠美芳;殷相平;柳纪省

作者机构：

关键词： 狂犬病病毒;糖蛋白膜外区;密码子优化;原核表达

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2012 年 28 卷 09 期

页码： 932-937

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的有效检测狂犬病毒抗原。方法本研究利用生物信息学软件对狂犬病病毒aG株糖蛋白膜外区进行分析,采用密码子优化策略将该序列的大肠杆菌稀有密码子优化成大肠杆菌常用密码子。将优化的序列合成与表达载体pET-28a(+)分别双酶切、胶回收后连接并转化至Rosetta(DE3)菌株。挑选阳性重组表达菌经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。同时对最佳表达条件进行了研究,重组菌在30℃、IPTG终浓度为0.6mmol/L、诱导表达6h时重组蛋白的表达量达到最大值。结果狂犬病病毒aG株糖蛋白膜外区通过密码子优化后能够在大肠杆菌中成功表达,表达产物具有良好的反应原性。结论该项研究为后续检测狂犬病毒抗原的ELISA试剂盒的研发建立基础。

分类号： R373

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