猪瘟病毒表面抗原E2基因的克隆与原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴思敏

作者： 吴思敏;王钊哲;许瑞;林矫矫;洪炀;陈兆国;陆珂;李浩;石耀军;江嘉欣;李嘉静;朱传刚;唐亚兰

作者机构：

关键词： 猪瘟病毒;E2基因;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2017 年 25 卷 05 期

页码： 32-36

收录情况： 北大核心

摘要： 为获得可用于诊断的猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)E2蛋白重组抗原,对CSFV-E2的多个B细胞抗原表位进行重构和表达。将人工合成的E2蛋白多抗原表位基因与p ET-28a(+)载体连接后,转化至宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析蛋白可溶性,His亲和层析柱纯化蛋白并进行抗原性检测。重构后的猪瘟病毒E2基因多抗原表位基因大小约500 bp,PCR、双酶切鉴定结果显示与预期相符;重组蛋白为可溶性表达,大小约23 k Da;Western blot结果显示,重组蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性,可作为诊断抗原用于猪瘟病毒感染动物的血清抗体检测。

分类号： S852.4

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