伪狂犬病病毒变异株gC抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吴学敏

作者： 吴学敏;陈如敬;陈秋勇;车勇良;严山;刘玉涛;周伦江;王隆柏

作者机构：

关键词： 伪狂犬病病毒;gC蛋白;酶联免疫吸附试验

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 2029-2034

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立变异伪狂犬病病毒FJ-2012株gC蛋白抗体间接ELISA检测方法，掌握不同猪场猪群的gC抗体水平情况。将FJ-2012株gC基因连接至pCzn1载体，转染至Arctic express（DE3）感受态细胞，IPTG诱导表达产物经SDS-PAGE和Western blot验证，通过矩阵法试验、临界值的确定、特异性试验、重复性和敏感性试验，建立PRV-gC抗体间接ELISA检测方法，并对源于不同猪场的280份血清进行PRV-gC抗体检测。结果表明，成功表达获得FJ-2012株pCzn1-gC重组蛋白；建立的间接ELISA方法的最佳抗原包被浓度为10μg·mL-1和最佳样品血清稀释比例为1∶50,阴性和阳性判定的OD650 nm临界值为0.406～0.438,介于之间的判定为可疑；临床检测结果显示，120份盲样猪血清PRV-gC抗体阳性率为91.67%、PRV-gB抗体阳性率为95.00%,两种抗体检测结果的整体符合率为95.83%;PR不稳定的猪场血样PRV-gC抗体阳性率为96.25%（77/80）,而PRV已净化的种猪场血样PRV-gC抗体阳性率为78.75%（63/80）。因此，建立的PRV变异株gC抗体间接ELISA检测方法为临床猪血清抗体检测提供了特异、灵敏和稳定的技术，也为开展变异PRV血清学调查奠定基础。

分类号： S852.651

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