辣椒SRAP-PCR反应体系主要影响因素的单因素和正交设计优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 何建文

作者： 何建文;杨文鹏;韩世玉;杨红

作者机构：

关键词： 辣椒;SRAP-PCR;优化

期刊名称： 种子

ISSN： 1001-4705

年卷期： 2009 年 28 卷 09 期

页码： 24-28+32

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： SRAP标记是一种新的分子标记技术,建立和优化所研究物种的SRAP反应体系是应用SRAP标记的技术关键。本研究以3个辣椒品种为试验材料,采用单因素试验设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的5个主要影响因子(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP和引物浓度)设置8个不同的水平梯度,筛选出比较适宜的Mg2+、dNTP、Primer、Taq酶、模板DNA浓度的范围。在此基础上,进一步采用L16(45)正交设计对辣椒SRAP-PCR反应体系的五因素在四个水平上进行优化实验,得出了如下的优化体系:25μl体系中包含1.5mmol/L的Mg2+、0.2mmol/L的dNTP、0.1μmol/L的单条引物、1U的Taq酶和60ng的模板DNA。经用24个辣椒材料进行扩增验证,该体系检测的结果重复性好,稳定性强。因此,本试验所获得的优化体系适用于辣椒的SRAP分子标记研究。

分类号： S641.3

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